Firenze, 23 aprile 2024
L’Ibridazione Fluorescente in Situ (FISH) dei campioni urinari si è dimostrata un test aggiuntivo prezioso alla citologia urinaria sia per la diagnosi che per il monitoraggio della recidiva del carcinoma uroteliale. In uno studio pubblicato nella Wiley Online Library, sono stati analizzati 3200 vetrini contenenti campioni di urina e ibridati con il kit Uro Vysion Bladder Cancer (Abbott Molecular, Des Plaines, Illinois), un set di 4 sonde che permettono la rilevazione dei cromosomi 3, 7, 17 e 9p21. I vetrini sono stati analizzati per un periodo di 7 mesi utilizzando il sistema Ikoniscope – oncoFISH (Ikonisys, New Haven, Connecticut).
La citologia urinaria dei campioni raccolti per esfoliazione spontanea e la cistoscopia vescicale sono attualmente i metodi standard con cui i pazienti vengono esaminati quando si presentano con ematuria o cancro.
La citologia urinaria ha un’alta sensibilità e specificità nel rilevare lesioni uroteliali di alto grado (SHGUC), tuttavia può avere problemi nel rilevare lesioni uroteliali di basso grado (NHGUC), a differenza della cistoscopia vescicale che però è considerata una tecnica invasiva, costosa e che richiede tempo. A causa di queste limitazioni, le tecniche che utilizzano biomarcatori molecolari sono spesso sfruttate come coadiuvanti nella diagnosi dei carcinomi uroteliali.
Il kit Uro Vysion per il cancro della vescica è un test per la rilevazione di aberrazioni cromosomiche in campioni di urina ottenuti per esfoliazione spontanea. Il kit contiene sonde DNA per l’ibridazione fluorescente in situ (FISH) che evidenziano i centromeri dei cromosomi 3, 7, 17 e 9p21, tutti associati al carcinoma uroteliale.
Inizialmente, i vetrini UroVysion venivano valutati al microscopio da un esperto, tuttavia sono state riscontrate limitazioni tra cui: basso rendimento, alto grado di sbiancamento della fluorescenza e impossibilità di tornare a una cellula di interesse al microscopio. Il Sistema di Test oncoFISH bladder (Ikonisys, New Haven, Connecticut) è un Sistema approvato dalla FDA per la scansione automatica di vetrini contenenti cellule da campioni urinari, fissate su un vetrino da microscopio e colorate utilizzando il kit UroVysion. Lo scopo di questo articolo era descrivere le caratteristiche di performance del test oncoFISH bladder.
In questo studio, i pazienti sono stati identificati dall’urologo, pazienti che presentavano ematuria persistente o pazienti a cui era stato chiesto di eseguire il Test FISH come follow-up di precedenti risultati citologici. Dopo aver ottenuto i vetrini di cellulosa e averli colorati utilizzando il kit UroVysion, sono stati posizionati all’interno delle apposite cassette Ikoniscope e scansionati. Con questa tecnica, ogni cellula all’interno dell’area di deposizione cellulare viene analizzata in modo che qualsiasi cellula anormale possa essere determinata con maggiore precisione.
Tutte le immagini e le informazioni diagnostiche vengono archiviate. Le immagini sono state analizzate da un tecnico addestrato che ha pre-ordinato le cellule, che sono state poi analizzate da un patologo. La qualità della preparazione del vetrino, inclusa l’abbondanza cellulare, l’efficienza di ibridazione FISH, la pulizia del vetrino e lo spostamento del coperchio hanno un impatto importante sulle prestazioni di scansione del sistema Ikoniscope.
L’analisi FISH dei campioni di urina si è dimostrata un test aggiuntivo prezioso alla citologia urinaria per la diagnosi e il monitoraggio della recidiva del carcinoma uroteliale.
La capacità del sistema di test Ikoniscope oncoFISH bladder di scansionare i vetrini rapidamente e accuratamente è un grande vantaggio per un laboratorio. Il software del sistema di test Ikoniscope oncoFISH bladder seleziona le cellule morfologicamente più anormali con il maggior numero di segnali FISH e produce immagini luminose e di alta qualità.
Le cellule vengono pre-classificate in sottoclassificazioni in ordine di priorità, in modo che le cellule più anormali vengano spostate in cima alla schermata di revisione, facilitando il processo analitico. Le cellule possono essere visualizzate individualmente, con altre cellule nello stesso campo visivo, in piani focali multipli o come un’immagine composita con tutti e 4 i segnali FISH visualizzati individualmente o simultaneamente.
Il sistema di test Ikoniscope oncoFISH bladder identifica e visualizza le cellule a un ritmo rapido, con una media di circa 31,7 minuti per caso e richiede un tempo medio di revisione di circa 8,3 minuti per caso, consentendo così un’elevata produttività. Questo sistema permette di scansionare i vetrini durante la notte in modo che i casi siano pronti per la revisione il giorno successivo.
In conclusione, questo studio dimostra il valore di un approccio automatizzato all’analisi dei vetrini. Il sistema utilizzato ha offerto il vantaggio di un’alta produttività fornendo all’utente le immagini e gli strumenti necessari per riportare un caso rapidamente e accuratamente. Un tale approccio ha il potenziale sia di migliorare l’efficienza del laboratorio che di ridurre la variabilità inter-osservatore e intra-osservatore, risultando in prestazioni di analisi più accurate e riproducibili.
Hospitex International, leader nella citologia a strato sottile e nella diagnostica del cancro, fornisce una soluzione basata su una tecnologia nefelometrica intelligente (NST) brevettata e all’avanguardia che consente un’implementazione nella tecnologia Ikonisys.
La tecnologia FISH di Ikonoscope consentirà l’integrazione di Urine24, il prodotto di diagnostica oncologica per il consumatore di Hospitex, migliorandone ulteriormente la sensibilità, l’affidabilità e l’efficienza e consentendo un’ulteriore crescita nella diagnosi del carcinoma uroteliale.
